Utilizarea alcalazei imobilizate în sinteza peptidelor

Abstract

În ultimii ani s-a îndreptat atenţia asupra dezvoltării şi obţinerii unor noi procese şi produse ecologice cu impact redus asupra mediului înconjurător şi sănătăţii umane, dar viabile din punct de vedere economic. Sinteza enzimatică a peptidelor cu efect terapeutic s-a dovedit într-o serie de procese o alternativă promiţătoare pentru industria farmaceutică. Producţia la scară industrială este favorizată de folosirea enzimelor imobilizate, deoarece acestea oferă o serie de avantaje comparativ cu cele solubile: condiţii blânde de reacţie, reutilizarea biocatalizatorului, evitarea autolizei enzimei care ar putea determina formarea metaboliţilor secundari. Cercetările efectuate în cadrul tezei de doctorat au urmărit obţinerea de noi biocatalizatori pentru modificarea peptidelor la gruparea carboxil terminală. S-a pus accent pe imobilizarea alcalazei în matrici siliconice de sol-gel, optimizarea metodei de imobilizare, caracterizarea preparatelor enzimatice obţinute şi optimizarea condiţiilor proceselor de hidroliză şi amidare ale grupării carboxilice C-terminale a peptidelor în vederea obţinerii unei eficienţe catalitice maxime şi a unei selectivităti ridicate. S-a studiat structura morfologică, iar enzima imobilizată a fost caracterizată prin determinarea activităţii catalitice, stabilităţii termice, operaţionale şi de condiţionare a enzimei. De asemenea, s-a studiat reproductibilitatea metodei de imobilizare, iar alcalaza imobilizata prin tehnica de sol-gel a fost standardizată pentru aplicaţii în sistemele continue.